血清谷丙转氨酶的测定实验报告,血清谷丙转氨酶的测定实验报告实验现象
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谷丙转氨酶活性测定的实验报告怎么写
谷丙转氨酶活性测定的实验报告要从以下几个方面入手:实验方法原理、实验材料、仪器、耗材、实验步骤。具体模板如下:
实验方法原理
血清谷丙转氨酶(SGPT)能催化丙氨酸与酮戊二酸生成谷氨酸和丙酮酸,丙酮酸在酸性条件下与2,4-二硝基苯肼可缩合成丙酮酸二硝基苯腙,该腙在碱性条件下呈现出橙红色,呈色深浅符合比尔定律,在520 nm处有最大吸收。
SGPT 在肝脏中含量最高,由于肝细胞损害,该酶逸出血液,可使 SGPT 含量明显增高。因此测定血清谷丙转氨酶的活性可作为肝中毒肝病的重要指标。
实验材料
丙酮酸、丙酮、α-酮戊二酸、dl-丙氨酸、2,4——二硝基苯肼、氢氧化钠
仪器、耗材
恒温水浴锅、分光光度计、吸量管、试管、试管架
实验步骤
1、标准曲线的绘制:取干燥洁净试管6支,编号。每管加0.5ml 2,4—二硝基苯肼,再保温20 min,分别向各管加入0.4 mol/L氢氧化钠溶液5 ml,室温下静置10 min后,用蒸馏水调零点。
于520nm处测光密度,以各管光密度减去空白管光密度为纵坐标,丙酮酸微克数为横坐标作标准曲线。
2、SGPT活力测定:取洁净干燥试管4支,即测定管、对照管各2支。各管反应完毕,混匀,室温下静置10 min后,再以蒸馏水调零点测定光密度。由标准曲线上查得丙酮酸微克数,根据下式计算SGPT 的活力:SGPT 活力(单位)=(测定管微克数-对照管微克数)/2.5×0.1。
扩展资料:
谷丙转氨酶活性测定的注意事项
1、在呈色反应中,2,4-二硝基苯肼可与有酮基的化合物作用形成苯腙,底物中α-酮戊二酸可与之发生反应,生成α-酮戊二酸苯腙。故制作标准曲线时,需要加入一定量的底物以抵消α-酮戊二酸的影响。
2、在测定 SGPT 活力时,应事先将底物、血清在37 ℃水浴中恒温,然后在血清管中加入底物,准时计时。
3、标准曲线上数值在20~100 U是准确可靠的,超过200 U 时,需将样品稀释。
4、丙氨酸应使用 DL-型,不使用 D-型。如使用 L-型,用量减半。
5、溶血标本不宜使用,因血细胞内转氨酶活力较高,会影响测定结果。
血清谷丙转氨酶活性测定实验分析怎么写
转氨酶广泛存在于机体的各个组织中,在肝组织中活性较高。正常新陈代谢情况下,血清中维持一定水平的转氨酶活性(正常值),当组织发生病变时,由于细胞肿胀坏死或细胞膜破裂使细胞膜通透性增高,而导致大量的 酶释放到血液中,从而引起血清中相应的谷丙转氨酶活性显著增高。(注:肝细胞纤维化时,谷丙转氨酶不升高)
血清谷丙转氨酶测定
1、颠倒是为了混合均匀;
2、保温30分钟是为了统一反应时间,便于比较,而且30分钟的曲线最直,变化呈线性;
3、空白管是为了扣除试剂本身的吸光度。空白管是试剂加蒸馏水,测出来也就是试剂空白。因为 操作环境、仪器状态、试剂稳定性等变异,所以要求每次都要测定试剂空白,称为实时试剂空白。
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