纳布啡可通过NF-κB通路来抑制急性炎症性内脏痛大鼠模型的炎症反应
1.纳布啡干预使急性内脏疼痛模型大鼠的行为发生改变
分别测量扭体数量和缩足反射阈值来评估疼痛反应。扭体实验结果显示AA组和AA+纳布啡组的扭体数量高于对照组。与AA组相比，纳布啡的镇痛作用（从10分钟开始出现）使得扭体数目显著减少。在机械性缩足反射阈值实验中，AA组PWT(3.50±0.73g)明显低于对照组(5.29±0.61g)，而AA+纳布啡组(11.35±2.59g)和AA+ PDTC组(10.08±1.63g)PWT明显高于对照组。结果表明纳布啡和NF-κB抑制剂PDTC对内脏疼痛均有较好的镇痛作用。
2.纳布啡可以抑制急性内脏疼痛大鼠的IL -1β、IL-2、IL-6和TNF-α的水平
ELISA结果显示，AA处理的大鼠在血浆中分泌的IL-1β、IL-2、IL-6和TNF-α水平高于对照组，而纳布啡则抑制了AA刺激的上述炎症因子水平的升高。这些结果充分证明了纳布啡的抗炎作用。PDTC作为NF-κB的抑制剂，在急性内脏疼痛中也起到了抗炎的作用。PDTC组中IL-1β、IL-2、IL-6、和TNF-α的水平明显低于AA组。
3.纳布啡可调节内脏痛大鼠脊髓中的p-NF-κB p65和IκBα。
NF-κB p65通常与抑制性IκBα蛋白结合，并在细胞中保持沉默。当磷酸化的IκBα被降解时，NF-κB p65被释放并易位到细胞核中，并最终导致基因转录的调控。因此，我们使用免疫印迹法和RT-qPCR法检测了p-NF-κB p65和IκBα的水平。结果显示，与对照组相比，AA处理的大鼠IκBα水平降低，增加了p-NF-κB p65蛋白的表达。此外纳布啡和PDTC也抑制了AA刺激的NF-κB p65mRNA水平的升高。因此，本研究表明，纳布啡通过下调脊髓中的NF-κB通路来抑制炎症反应。
4.纳布啡和PDTC下调脊髓中IL-1β、TNF-α和IL-6
为了确定纳布啡和PDTC治疗期间脊髓中的炎症反应是否增加，我们测量了IL-1β、TNF-α和IL-6在腰椎脊髓中的表达。免疫印迹法和RT-qPCR结果显示，乙酸可上调IL-1β、TNF-α、IL-6蛋白及其mRNA表达。与AA组大鼠相比，纳布啡可降低IL-1β、TNF-α和IL-6的mRNA和蛋白水平。表明纳布啡不仅能降低血浆中炎性因子的表达，还能降低脊髓中炎性因子的表达。与AA组相比，NF-κB抑制剂PDTC也可降低脊髓中IL-1β、IL-6和TNF-α水平，发挥抗炎作用。
5.纳布啡降低脊髓白质中的p-NF-κB和TNF-α蛋白水平
在研究中，IHC分析显示，醋酸增强了AA组的p-NF-κB和TNF-α的表达，而纳布啡可以逆转这种变化。IHC分析结果由免疫印迹法和RT-qPCR检测组成。因此，我们进一步推测纳布啡是通过下调NF-κB来发挥其抗炎作用的。此外，我们发现p-NF-κB和TNF-α主要分布于各组大鼠的脊髓白质中。
6.结论
综上所述，纳布啡可以通过抑制NF-κB(p65)的激活，减少下游促炎性细胞因子的释放，从而抑制急性炎症性内脏疼痛的强烈反应。
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供稿：医学部
（宜昌人福药业市场部）
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