慢病毒基因疗法临床结果积极，治疗罕见病数据亮眼

➤离体慢病毒介导的基因疗法RP-L102治疗范可尼贫血患者

范可尼贫血（FA）是一种罕见的儿科疾病，大约60-70%的FA患者有FANCA 基因突变，该突变编码一种对DNA修复至关重要的蛋白质。FANCA中的突变基因导致染色体断裂并增加对氧化和环境压力的敏感性。患者容易出现骨髓功能失常和癌症易感。

RP-L102是一款使用慢病毒载体递送正常FANCA基因，体外改造造血干细胞的基因疗法。此次公布的数据来自接受RP-L102治疗的12名患者中最初的9名患者。

9名可评估患者中有5名患者显示骨髓细胞对DNA损伤药物MMC的耐药性增加，表明患者骨髓细胞对DNA损伤的修复能力增强，达到了试验的主要终点。外周VCN证明，第6名患者显示出基因校正逐渐增加的证据。另外两名患者目前仅在治疗后12个月，一名患者出现进行性骨髓衰竭，并进行成功的同种异体移植。12名接受治疗的患者中有3名尚未达到12个月的时间点。

RP-L102的安全性表现良好，没有发育异常、克隆优势或致癌整合的迹象；如先前报道的，一名患者出现2级短暂输注相关反应，随后消退。

➤AAV9介导的基因疗法RP-A501治疗达农病

达农病（DD）是一种非常罕见的危及生命的疾病，由于细胞中负责清除与回收蛋白质的基本生物过程失去功能。这是一种罕见的X-连锁自噬空泡性肌肉病变，会导致包括心脏、骨骼肌、神经系统、眼睛和肝脏在内的多器官功能障碍，目前还没有专门的治疗方法。

RP-A501由AAV9载体递送功能性人源LAMP2B转基因（AAV9.LAMP2B）。单次静脉注射后，这些基因将在非分裂细胞中以游离体形式稳定存在并表达，从而有效治疗单基因遗传病。

本次公布的数据包括先前披露的低剂量（6.7 x 1013 GC/kg；n=3）和高剂量（1.1 x 1014 GC/kg；n=2）年轻成人和青少年患者的安全性和有效性数据，以及来自低剂量（6.7 x 1013 GC/kg；n=2）儿童队列的安全性数据。

在年轻成人和青少年低剂量队列中，RP-A501具有良好的耐受性。所有年轻成人和青少年患者在分子、超声心动图和患者功能参数方面都表现出疾病改变。

在儿童队列中，RP-A501在两名患者中均具有良好的耐受性。观察到患者的血小板范围正常，补体激活减少，没有补体相关的不良事件。这两名患者接受了改良免疫抑制方案的预防性治疗。到目前为止，没有观察到明显的即时或延迟毒性。

➤慢病毒介导的基因疗法RP-L301治疗丙酮酸激酶缺乏症

丙酮酸激酶缺乏症（PKD）是一种罕见的单基因红细胞疾病，由编码丙酮酸激酶的PKLR基因突变引起，丙酮酸激酶是红细胞糖酵解途径的关键组成部分。PKLR基因的突变导致红细胞破坏增加，伴有轻度到危及生命的不同程度贫血。

RP-L301是以慢病毒为载体，用于治疗PKD的基因治疗候选药物。此次公布的数据来自两名接受RP-L301治疗的患有严重贫血症的成年患者。

在输注后18个月，两名患者均具有持续的转基因表达、血红蛋白正常化、溶血改善、移植后无需红细胞输注以及生活质量改善。RP-L301的安全性表现良好，输注后18个月没有与IP相关的严重不良事件。

LV与γ-逆转录病毒同属逆转录病毒科，都是将其双链DNA整合进宿主基因组，然后利用宿主的机制将其基因转录回RNA。一旦完成复制并回到胞浆，病毒RNA被翻译并被包装进一个新的病毒颗粒中，然后以出芽方式离开细胞完成生命周期。

LV对分裂和非分裂细胞的感染效率能达到30%，而γ-逆转录病毒对大多数细胞的感染效率30%，并且依赖细胞的分裂。因此，慢病毒载体是目前大多数造血干细胞（HSC）编辑的首选工具。

LV虽然和γ-逆转录病毒一样存在可能发生插入突变的安全性问题，但后者会整合入基因的5'非翻译区，前者则优先整合进基因的编码区域，从而降低致癌风险。

对比重组腺病毒（Ad）以及腺相关病毒（AAV），LV能携带更大、更复杂的转基因，并且具有整合转基因到宿主基因组的能力使产物稳定和长期的表达。

除Rocket以外，还有包括蓝鸟（Bluebird Bio）、Orchard Therapeutics、野马生物（Mustang Bio）、Oxford BioMedica、AVROBIO等在内的多家公司均在进行慢病毒基因疗法的研究。

➤蓝鸟（Bluebird Bio）

蓝鸟是一家专注于使用慢病毒基因疗法以治疗严重遗传疾病的生物科技公司，有3个主要管线产品，分别为Beti-Cel（用于治疗β-地中海贫血）、Lovo-Cel（治疗镰状红细胞病）和Eli-Cel（治疗肾上腺脑白质营养不良）。

Beti-cel是蓝鸟的首个基因疗法，也是全球第一款针对TDT的基因治疗产品。2019年6月初，Beti-cel被欧盟委员会（EC）有条件批准，用于治疗12岁及以上的非β0/β0基因型输血依赖性β-地中海贫血患者，然而由于数据和制造问题被EMA推迟到2020年1月，才在德国首次商用，商品名为Zynteglo。

➤Orchard Therapeutics

Orchard Therapeutics的OTL-103是一种自体造血干细胞基因疗法，包括用编码Wiskott-Aldrich综合征（WAS）基因的慢病毒载体体外转染的CD34+细胞，旨在通过单次注射治疗Wiskott-Aldrich综合征。该疗法已获得FDA授予的孤儿药资格和罕见儿科疾病（RPD）资格。目前，评估疗效和安全性的3期临床试验正在进行中。

OTL-101是一种造血干细胞和祖细胞（HSPC）+患者自体CD34，从患者体内分离CD34阳性HSC，在体外通过自灭活慢病毒转导正确的腺苷脱氨酶（ADA）基因，用于治疗腺苷脱氨酶缺乏症导致的严重联合免疫缺陷患者（ADA-SCID）。目前，OTL-101已经获得美国FDA和欧盟EMA用于治疗ADA-SCID的孤儿药资格。2021年5月11日，OTL-101正在进行的1/2期临床结果表明，在ADA-SCID在接受基因治疗2年和3年研究后，总生存率为100%。

OTL-200是一款基于慢病毒载体的、自体的造血干细胞基因疗法，利用含有人芳基硫酸酯酶A（ARSA）基因的慢病毒载体对自体分化CD34+细胞进行转染，使细胞表达芳基硫酸酯酶A，从而治疗异染性脑白质营养不良（MLD）。2020年11月，美国FDA批准了OTL-200的IND申请。

➤野马生物（Mustang Bio）

2021年11月，野马生物宣布与莱顿大学医学中心（LUMC）签署了一项独家许可协议，以获得用于治疗RAG1严重联合免疫缺陷（RAG1-SCID）的首个体外慢病毒基因疗法。

该疗法包括在回输患者自身基因修饰的造血干细胞之前进行低剂量调节，目前正在欧洲进行 1/2 期多中心临床试验评估。正在进行的临床试验最近招募了第一名患者，预计在不久的将来还会增加更多的临床站点。RAG1-SCID 项目已被欧洲药品管理局（EMA）授予孤儿药称号。

➤Oxford BioMedica

Oxford是慢病毒载体基因治疗的先驱，并且是诺华的CAR-T产品Kymriah生产慢病毒载体的唯一供应商。产品研发方面，凭借LentiVector®慢病毒载体递送技术，该公司与赛诺菲、GSK等一线药企建立了良好合作关系，具有庞大的资金来源，包括工艺开发和生物加工收入以及特许权使用费。此外，该公司针对眼科疾病、帕金森氏病在内的基因疗法的临床研究也在稳步推进中。

➤AVROBIO

AVROBIO致力于推进数项慢病毒基因疗法，针对包括法布里病、戈谢病、胱氨酸病和庞贝氏病在内的溶酶体贮积症。该公司设计了专有的第三代4质粒慢病毒载体系统，这是一种有效且经过验证的基因转移系统，可将基因稳定添加到患者自身的CD34+细胞中。

AVROBIO的慢病毒方法旨在使处理过的干细胞能够分化成许多不同的细胞类型-包括T细胞，B细胞和单核细胞，每种细胞都有望携带治疗基因。当单核细胞进入组织时成为巨噬细胞，在中枢神经系统（CNS）中，它们成为小胶质细胞。携带治疗基因的单核细胞，巨噬细胞和小胶质细胞被认为具有穿越血脑屏障并进入CNS的能力。这些治疗细胞一旦分散在大脑和中枢神经系统，就可能能够减缓、阻止甚至预防中枢神经系统的疾病进展。

➤本导基因

2021年12月30日，上海本导基因技术有限公司对外公布：由中国人民解放军联勤保障部队第九二〇医院和上海本导基因技术有限公司合作开展的“慢病毒载体转导自体CD34+造血干细胞治疗输血依赖型β-地中海贫血的安全性和有效性研究”的临床实验已取得初步成效。这是国内首次报道基于慢病毒载体基因转导技术治疗β-地中海贫血的成功案例。目前，本导基因正积极推进其基于慢病毒载体的β-地中海贫血基因疗法IND申报工作。

➤康霖生物

康霖生物科技（杭州）有限公司自2015年成立以来，始终专注于基因治疗创新药物的研发，针对的领域多为严重影响人类健康的疾病，如艾滋病、帕金森病、血友病和地中海贫血症等。康霖生物是目前国际上少见的同时具备慢病毒和腺相关病毒载体高水平研发与生产能力的公司。

2022年5月，康霖生物宣布其自主研发的地中海贫血症创新基因治疗药物KL003在研究者发起的临床试验中已成功治愈2名重症患者，且各项指标远优于国际上最领先的美国蓝鸟生物。

➤中吉智药

中吉智药β地贫基因治疗管线采用基因替代疗法，利用慢病毒将正确的β-珠蛋白基因导入造血干细胞，并回输给患者提升β-珠蛋白的表达，促使HbA的生成，从而对β-地中海贫血实现治疗或治愈目的。其中利用体外造血干细胞红系分化平台，将CD34+细胞进行21天诱导分化，收取红细胞，裂解后进行HPLC检测评估β珠蛋白在β地贫受试者体外分化红细胞中的表达水平。目前该管线已进入IIT临床研究和IND申报阶段。

小结

目前，已有多种病毒类型被研究用作基因治疗中的病毒载体，包括LV、AAV和逆转录病毒。以AAV作为递送载体的基因疗法在多种适应症上取得了进展，包括一系列罕见眼科疾病、血友病、亨廷顿舞蹈病、法布里病、糖原贮积症等。

而大多数公司开发以慢病毒作为递送载体的基因疗法的策略是用慢病毒载体转导自体干细胞，针对以造血干细胞移植为唯一治疗手段的许多疾病，慢病毒基因疗法很有可能创造新的治疗前景。然而，慢病毒也存在因为随机插入造成基因突变的风险，因此一直以来对它的担心是转基因整合到基因组的某些位点上可能导致癌症的发生。

在未来很长一段时间内，病毒载体仍将是主流的基因递送工具，面对安全性隐患，针对病毒载体的改良和优化将是研究者们工作的重中之重。

参考资料：

1.https://www.biospace.com/article/releases/rocket-pharmaceuticals-presents-positive-clinical-data-from-danon-disease-fanconi-anemia-and-pyruvate-kinase-deficiency-programs-at-the-25th-annual-meeting-of-the-american-society-of-gene-and-cell-therapy-asgct-/

2.各公司官网

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